La sala accoglie una preziosa selezione di capolavori senesi del Trecento.

I due straordinari dipinti che si fronteggiano provengono dal duomo di Siena.
L'Annunciazione di Simone Martini e Lippo Memmi e la Presentazione al Tempio di Ambrogio Lorenzetti, sono forse i primi esempi di pala d'altare che hanno per soggetto un episodio dei Vangeli, invece che un'icona da venerare, in quanto nel duomo senese l'immagine della Madonna, protettrice della città, era raffigurata nella grande Maestà dipinta da Duccio.

Le due opere testimoniano diverse tendenze dell'arte senese: una, qua rappresentata da Simone Martini, che sviluppa tutte le raffinatezze lineari e cromatiche del gotico, e un'altra, interpretata dai fratelli Pietro e Ambrogio Lorenzetti, attenta alle novità giottesche.

Di Pietro Lorenzetti la sala espone un'opera di grande interesse, il Polittico della Beata Umiltà, che nei suoi pannelli dedicati alla vita della Beata, illustra numerosi aspetti della vita nel medioevo.